Качественное исследование помогает выявить вирус, а количественное - определить степень вирусной нагрузки (виремия). Чтобы увидеть клиническую картину течения болезни в динамике, проводится повторный анализ.
Автором метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) стал Кэри Муллис. В основе метода - принцип копирования структуры вируса. Исследование помогает выявить ДНК возбудителя в крови и определить его количество. В сыворотке инфицированных людей есть белковый антиген - элемент вирусной оболочки. Этот антиген распознается иммунной системой, которая начинает вырабатывать антитела для обезвреживания вируса. Понять, насколько активен возбудитель, можно по концентрации антигенов и антител.
Анализ проводится следующим образом: цепочку ДНК расщепляют, сначала повышая, а затем резко понижаю температуру в ПЦР-машине. После этого создают копии исследуемого материала, присоединяя маркеры к ДНК. Далее с помощью копий определяют количество вирусных частиц в 1 мл крови.
Результаты качественного анализа, который помогает обнаружить вирус, применяются для определения стадии болезни. Это исследование пропроходят следующие группы людей:
Что касается количественного анализа, то его проводят в следующих случаях:
Для проведения исследования требуется венозная кровь (забор делается натощак). Чтобы добиться высокой точности результатов, пациенту необходимо правильно подготовиться к анализу.
Количественное и качественное исследование схожи, поскольку оба метода основаны на свойствах ДНК возбудителя, который синтезирует особые чужеродные белки. Несмотря на то, что вирус отличается сложной структурой, ПЦР-метод позволяет выявить частицы возбудителя.
Оценив концентрацию маркеров HBsAg и HBeAg, специалисты определяют стадию болезни и эффективность лечения. При острой форме в крови присутствуют оба маркера. Наличие HBeAg - это показатель того, что пациент является вирусоносителем и может заражать окружающих. Изучив анамнез больного, врач выбирает ту или иную методику ПЦР.
С помощью количественных показателей можно узнать:
Поскольку концентрация вирусных частиц в ходе заболевания постоянно изменяется, анализ следует проводить неоднократно. По окончании инкубации повышается уровень HbsAg, после чего появляется антиген HBeAg, который находится в ядре вириона. Затем HBeAg исчезает - его заменяют антитела (это признак того, что организм борется с возбудителем). Количественный метод помогает выяснить, какую вирусную нагрузку испытывает иммунитет. Кроме того, благодаря анализу удается узнать, насколько опасна хроническая форма болезни.
Специалисты ориентируются на норму трансаминазы, при которой заразность вирусоносителя минимальна. Состоящие на учете пациенты проходят исследование один раз в три месяца. Уровень вирусной нагрузки - это показатель того, в насколько тяжелой форме протекает заболевание. Если виремия превышает норму в 2 раза, то схему лечения необходимо изменить, предварительно проведя дополнительное обследование.
Этот ультрачувствительный метод позволяет точно установить, что в организме находится вирус гепатита В, и тем самым подтвердить предварительный диагноз или опровергнуть его.
В 50% случаев обнаружить ДНК вируса можно еще до того, как организм начнет вырабатывать антитела. Необходимо отметить, что иммунная система не сразу может распознать инородные белки (они обнаруживаются, когда размножившийся возбудитель покидает клетки печени).
Уничтожая антигены, иммунная система также разрушает гепатоциты, что вызывает развитие осложнений. Если возбудитель гепатита В находится в организме более 2 месяцев, то болезнь становится хронической. Победить вирус на ранней стадии (т.е. в течение первых 2 недель) гораздо легче.
Результат качественного анализа - это подтверждение или опровержение того, что в биоматериале присутствует возбудитель. Если при исследовании был обнаружен вирус, то результат становится положительным. Это значит, что сдавший анализ человек болен либо является вирусоносителем.
Качественное исследование проще количественного, поэтому интерпретировать результаты может обычный лаборант. Метод широко востребован, поскольку для его применения не требуется узкая специализация.
При количественном исследовании важно не только установить факт присутствия возбудителя, но и определить количество вирусных копий. Такой анализ проводится только в крупных лабораториях при обязательном участии врачей.
Основные варианты результатов количественного ПЦР-анализа выглядят следующим образом:
Результаты анализов необходимы лечащему врачу, чтобы специалист мог оптимально интерпретировать данные. Консультация требуется даже в том случае, если результат оказался отрицательным. При высоком уровне виремии пациенту следует немедленно обратиться к врачу, который сможет скорректировать схему лечения и спасти жизнь больного.
Сегодня ПЦР-метод является наиболее точным методом диагностики. Он позволяет обнаружить скрытые и мутировавшие формы возбудителя, диагностировать болезнь на ранней стадии и провести своевременную терапию. То, какое исследование будет назначено (качественное или количественное), зависит от конкретной ситуации. Чтобы получить направление на анализ, следует обратиться к гепатологу, вирусологу или инфекционисту.
